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              組織研磨均質儀用于提取小鼠皮膚的DNA的具體步驟

              發布時間:2021-11-18瀏覽:11次
                組織研磨均質儀是實驗室樣品制備常用工具,它通過碳化鎢小球或不銹鋼小珠在樣品管內來回震蕩實現樣本的粉碎、混合、均化以及細胞破碎等,可以對硬性、軟性、彈性等樣品進行快速的粉碎和均相化處理,符合理化分析實驗室的要求,配置不同體積、不同材料的研磨罐,可以進行干磨、濕磨及冷凍研磨,也可以進行細胞破碎和DNA/RNA提取,在農業、生物醫藥、食品、質檢、高校等各行各業都有廣泛的應用。
               
                組織研磨均質儀是實驗室常見的儀器,很多實驗人員知道組織研磨均質儀可以用來研磨組織用來提取DNA,但是具體的實驗步驟卻摸不清頭腦,今天我就拿研磨儀通過小鼠皮膚提取DNA來做個示范,不懂實驗步驟的要拿筆好好記一下了。
               
                實驗步驟:
               
                1、在2ml圓底離心管單管放入小鼠皮膚樣品40-50mg;
               
                2、在離心管中加入5mm硬質不銹鋼研磨珠1顆,蓋好管蓋,裝入鼎昊源TL1000自動研磨儀適配器中;
               
                3、將裝有樣品的適配器浸入液氮中;
               
                4、待液氮不沸騰后取出,迅速安裝上機,采用間歇研磨方法;
               
                5、間歇研磨參數設置為轉速2000rpm,每次自動研磨1分鐘,間歇10s,循環4-5次效果好,從膠圖看RNA濃度較高;
               
                6、研磨結束后,將離心管取出,每管加入裂解液(Trizol)0.5ml,之后進行離心、純化等,做后續RNA提取實驗。
               
                根據我的試驗經驗,使用研磨儀研磨小鼠皮膚,參數設置轉速大于1600rpm,其他設置均采用以上案例中設定不變,都可以成功研磨并提取RNA。不過采用案例中的方法自動研磨效果好。

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